目的:构建人野生型和c.454CT突变型血管内皮生长因子A(VEGFA)真核表达载体。方法:采用反转录聚合酶链反应扩增人VEGFA基因,用限制性核酸内切酶BglⅡ和SalⅠ双酶切后连接真核表达载体pEGFP-N1,构建野生型VEGFA真核表达载体(野生型pEGFP-VEGFA),通过双酶切和测序进行鉴定。采用定点诱变PCR技术构建c.454CT突变型人VEGFA真核表达载体(突变型pEGFP-VEGFA),同样通过双酶切和测序进行鉴定。结果:野生型和突变型pEGFP-VEGFA被双酶切为4 697 bp和1 251 bp两条条带。测序结果证实野生型pEGFP-VEGFA VEGFA序列与GenBank公布的VEGFA mRNA序列完全一致,突变型pEGFP-VEGFA除第454位碱基C被T替代以外,其余序列与野生型完全一致。结论:成功构建了野生型和突变型pEGFP-VEGFA,为下一步研究VEGFA基因功能提供参考。

目的调查婴幼儿毛细支气管炎后反复喘息发生情况，并探讨其相关影响因素。方法选择102例毛细支气管炎婴幼儿，随访1年了解患儿喘息发作情况。同时根据患儿是否发生喘息进行分组，比较2组患儿的一般资料、哮喘家族病史、宠物接触史、过敏疾病史、毛细支气管炎病情等。结果102例患儿中，共有3例失访。随访3、6、9、12个月，至少出现1次喘息发作的例数分别为16例(16.16%)、34例(34.34%)、39例(39.39%)、43例(43.43%)，其中，随访12个月内，发生1次喘息8例，发生2次喘息11例，≥3次喘息24例。经单因素分析，反复喘息组与非反复喘息组患儿在母乳喂养少于3个月、被动吸烟史、湿疹病史、反复下呼吸道感染史、家族过敏疾病史、重度毛细支气管炎、呼吸道合胞病毒感染、食物过敏史方面差异均有统计学意义(P < 0.05~P < 0.01)。经logistic多因素分析，重度毛细支气管炎、湿疹病史、家族过敏疾病史以及反复下呼吸道感染毛细支气管炎后反复喘息的危险因素均为毛细支气管炎后反复喘息的危险因素(P < 0.05)，而母乳喂养>3个月是毛细支气管炎后反复喘息的保护因素(P < 0.01)。结论重度毛细支气管炎、家族过敏疾病史、湿疹、反复下呼吸道感染是毛细支气管炎后反复喘息发作的高危因素，临床应针对性做好防治工作，以减少喘息发作。

目的探讨出生后早期雾化吸入布地奈德混悬液预防早产儿支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia，BPD)的疗效和安全性。方法采用前瞻性随机队列研究设计，将2017年11月至2020年5月某院新生儿科收治的胎龄 < 32周且在出生后3 d内接受机械通气或经鼻持续气道正压通气的102例早产儿随机分为干预组(n=50)和对照组(n=52)，干预组雾化吸入布地奈德混悬液，对照组雾化吸入等量0.9%氯化钠溶液。比较2组主要结局和次要结局。结果干预组BPD或死亡发生率低于对照组(P < 0.05)，干预组存活者BPD发病率低于对照组(P < 0.05)，2组死亡率差异无统计学意义(P>0.05)。干预组中重度BPD发病率低于对照组(P < 0.05)，2组轻度、中度、重度BPD发病率差异均无统计学意义(P>0.05)。干预组常压氧疗时间和住院时间均少于对照组(P < 0.01和P < 0.05)。2组并发症发生率、体质量变化值、血红蛋白、血小板、肝肾功能电解质及肺表面活性物质、枸橼酸咖啡因和地塞米松使用率均无统计学意义(P>0.05)。结论出生后早期雾化吸入布地奈德混悬液可降低机械辅助通气早产儿BPD和中重度BPD的发病率，对死亡率无明显影响，无近期不良反应。

目的:探讨血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)基因变化在二叶式主动脉瓣(bicuspid aortic valve,BAV)发生中的作用。方法:对74例BAV和300名正常对照VEGFA基因所有编码外显子及其侧翼序列进行测序分析,并对有碱基变化的患儿进行家系调查。结果:2例患儿存在c.1039 G>A(p.Val347Ile)杂合型单核苷酸多态性(SNP),1例患儿存在c.1039 G>A(p.Val347Ile)纯合型SNP,均未见报道。BAVVEGFA1039A等位基因频率(2.70%)高于正常对照组(0.33%)(P<0.05)。2例杂合型患儿其SNP遗传自母亲。纯合型患儿的家系中,8人为杂合型SNP携带者,2人为主动脉根部扩张,其中1人为杂合型SNP携带者。结论:VEGFA基因c.1039 G>A SNP可能增加BAV的发生危险。主动脉根部扩张和BAV可能有共同的发生危险因素。

目的: 探讨小儿单纯疱疹病毒脑炎(herpes simplex encephalitis,HSE)的临床特点、检测手段及治疗。方法: 对22例经酶免疫斑点技术确诊为HSE的小儿的临床资料进行分析,所有病例均给予更昔洛韦(ganciclovir,GCV)治疗。结果: 小儿HSE多见于5岁以上农村患儿,临床表现以发热、呕吐、抽搐、瘫痪、意识障碍和锥体束征为主,头颅影像学检查多见额叶和颞叶损害,治愈7例,好转14例,未愈1例。结论: 小儿HSE临床表现不典型,血清中出现特异性单纯疱疹病毒IgM抗体是HSE的实验室诊断依据,头颅影像学表现为额颞叶损害时高度提示HSE,GCV是治疗小儿HSE的首选药物。

目的: 探讨以问题为基础的教学法(problem-based learning,PBL)在儿科心血管系统疾病理论课教学中的应用效果。方法: 以掷硬币法将2008级药学本科生定为PBL组(n=107),2008级预防医学本科生定为以讲授为基础的教学(lecture-basedlearning,LBL)组(n=104)。对2组学生分别采用PBL和LBL教学法学习儿科心血管系统疾病,采用问卷调查形式比较2组学生对PBL和LBL教学法的态度,并比较2组学生的理论考试成绩。结果: PBL组学生对PBL教学法持赞成态度的百分率为88.8%,高于LBL组学生对LBL教学法持赞成态度的59.6%(P < 0.01),且PBL组理论考试成绩显著高于LBL组(P <0.01)。结论: PBL教学法效果优于LBL教学法,可用于儿科心血管系统疾病的理论课教学。

目的分析儿童青少年新诊断糖尿病酮症酸中毒(DKA)的临床表现、遗传学及随访结局。方法回顾分析23例DKA患儿的临床和随访资料，自愿接受基因检查者给予二代测序。结果男6例，女17例，中位年龄10.1岁。1型糖尿病(T1DM)22例，2型糖尿病(T2DM)1例。烦渴多饮多尿22例，呼吸深长16例，腹痛恶心呕吐12例，发热5例，意识障碍12例，休克15例。中位随机血糖25.0 mmol/L(11.48~34.72 mmol/L)，平均糖化血红蛋白13.62%(9.80%~17.40%)，C肽降低22例，平均0.18 ng/mL(0.05~0.37 ng/mL)，平均静脉pH 7.06(6.80~7.23)，糖尿病自身抗体阳性10例。所有患儿给予补液、小剂量胰岛素持续静脉泵入治疗，1例转院，22例抢救成功。DKA纠正后T1DM患儿给予胰岛素治疗，T2DM患儿口服二甲双胍。随访18例，平均随访26.5月(5~57个月)，1例T2DM患儿HbA1c 6.8%，17例T1DM患儿平均HbA1c 8.79%(5.5%~14.4%)，中位C肽0.09 ng/mL(0.05~0.50 ng/mL)，3例T1DM患儿糖尿病自身抗体转阳性。2例T1DM患儿接受二代测序，其中1例PDE11A外显子2存在c.20_21delGA杂合缺失变异，导致阅读框改变，蛋白质截短(p.Arg7ThrfsTer30)，父亲为野生型，母亲为杂合携带。结论儿童青少年新诊断DKA多见于T1DM，临床表现多样，HbA1c达标率低，PDE11A基因突变可能与T1DM有关。

目的探讨吸入用布地奈德联合孟鲁司特钠、左西替利嗪治疗小儿咳嗽变异性哮喘的临床疗效。方法选取80例6~12岁确诊为咳嗽变异性哮喘的患儿作为研究对象, 随机分为观察组和对照组, 各40例。对照组采取吸入用布地奈德吸入气雾剂吸入治疗及相应的对症支持治疗, 观察组在对照组的基础上加用口服孟鲁司特钠及左西替利嗪治疗。通过测定治疗前后炎症因子水平及肺功能指标, 并记录总有效率和不良反应发生情况, 评价临床疗效。结果观察组总有效率为100.00%高于对照组的72.50%(P < 0.01)。治疗前, 2组患儿的炎症因子水平及肺功能指标差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后, 观察组与对照组IgE、IL-4、IL-13水平均明显低于治疗前(P < 0.01), 且观察组降低幅度大于对照组(P < 0.01), 治疗后, 观察组和对照组肺功能指标均明显高于治疗前(P < 0.01), 且观察组升高幅度大于对照组(P < 0.01)。观察组的不良反应发生率7.50%与对照组的22.50%差异有统计学意义(P < 0.05)。结论吸入用布地奈德联合孟鲁司特钠、左西替利嗪治疗小儿咳嗽变异性哮喘能够显著提升有效率, 降低炎症因子水平, 改善肺功能, 效果显著, 值得临床上推广使用。

目的: 探讨婴儿巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)感染的临床特点、检测手段及治疗。方法: 对25例经酶免疫斑点技术确诊为CMV感染的婴儿的临床资料进行分析。结果: 支气管肺炎11例(44%),中枢神经系统损害11例(44%),高胆红素血症8例(32%),所有病例均给予更昔洛韦(ganciclovir,GCV)治疗,支气管肺炎治愈8例,好转3例;中枢神经系统损害治愈1例,好转9例,未愈1例;高胆红素血症治愈2例,好转6例。结论: 婴儿CMV感染以支气管肺炎、中枢神经系统损害和高胆红素血症为多见,血清特异性CMV-IgM抗体阳性为CMV感染的实验室诊断依据,GCV是治疗婴儿CMV感染的首选药物。

目的：探讨早产儿血糖紊乱的特点、调控方法和相关危险因素。方法：将日龄3 d以内的84例早产儿按体重分为1 500 g组(30例)和1 500 g组(54例)。2组早产儿入院后即刻用血糖仪测定全血血糖，然后给予葡萄糖静脉输注，速度设定为6 mg.kg-1.min-1，根据全血血糖监测情况及时调整葡萄糖输液速度，必要时给予胰岛素治疗，分析早产儿血糖紊乱的特点和相关危险因素。结果：入院初始发生低血糖11例(13.1%)，其中体重1 500 g组低血糖发生率为26.7%，明显高于体重1 500 g组的5.6%(P0.05)。输糖后发生高血糖41例(48.8%)，其中体重1 500 g组高血糖发生率为73.3%，明显高于体重1 500 g组的35.2%(P0.01)。41例高血糖中除2例持续性高血糖使用胰岛素治疗外，余39例均通过减慢葡萄糖输液速度得到控制。多因素Logistic回归分析显示体重1 500 g(P0.05)、窒息(P0.01)、缺氧性脑损伤(P0.01)和颅内出血(P0.05)为早产儿高血糖独立危险因素。结论：早产儿尤其是极低出生体重儿出生后第1周易发生血糖紊乱，高血糖较低血糖更加常见。多数早产儿高血糖通过减慢葡萄糖输液速度可以得到控制。体重1 500 g、窒息、缺氧性脑损伤、颅内出血是早产儿高血糖的独立危险因素。